血液凝結(jié)酶是大部分病原菌株能造成的凝結(jié)酶,能使帶有肝素等抗凝劑的人或兔血液產(chǎn)生凝結(jié)的酶類(lèi)物質(zhì),發(fā)病株大部分能造成,是辨別葡萄球菌有沒(méi)有高致病的關(guān)鍵指標(biāo)值。

血液凝結(jié)酶相對(duì)分子質(zhì)量為80449.3,等電點(diǎn)為8.82,耐溫性強(qiáng),100℃30Min依然維持特異性,可被胰蛋白酶毀壞。橙黃色葡萄球菌血液凝結(jié)酶有二種遍布:一種代謝至菌身體之外的,稱(chēng)之為分散凝結(jié)酶(freecoagulase);另一種存有于菌體植物細(xì)胞上,稱(chēng)之為融合凝結(jié)酶(boundcoagulase)或匯集因素(chumpingfactor)[1]。血液凝結(jié)酶具備較強(qiáng)抗原性,漫性橙黃色葡萄球菌感染病人血液可以檢驗(yàn)到很多血液凝結(jié)酶抗原的存有。血液凝結(jié)酶能被別人血液中的協(xié)作因素(cofactor)激話(huà)變?yōu)槟割?lèi)似物,從而催化反應(yīng)可溶纖維蛋白原變成不可溶游離脂肪酸,進(jìn)而使血液凝結(jié)。不可溶游離脂肪酸包囊在菌體表層,在其維護(hù)下菌體既能免遭血細(xì)胞中除菌物質(zhì)的功效,也可以抵御巨噬細(xì)胞的吞幢。
橙黃色葡萄球菌造成的感染便于局限性化和產(chǎn)生靜脈血栓,不常產(chǎn)生全身感染,這與凝結(jié)酶息息相關(guān)。血液凝結(jié)酶實(shí)驗(yàn)是分辨橙黃色葡萄球菌的發(fā)病力的關(guān)鍵方式,另外也是橙黃色葡萄球菌最重要的鑒別手段。

血液凝結(jié)酶的檢驗(yàn)最常見(jiàn)的方式是兔血液凝結(jié)法,標(biāo)準(zhǔn)操作步驟以下:
用鹽水將兔血細(xì)胞1:5稀釋液,取化0.5mL稀釋液后的兔血細(xì)胞添加到試管嬰兒中,加上0.3mL待測(cè)液,試品和血細(xì)胞混和勻稱(chēng)置37℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),每間距30min觀查1次結(jié)果。該實(shí)驗(yàn)需要另外做己知試品的呈陽(yáng)性、陰性對(duì)照。若6h內(nèi)試品管出現(xiàn)凝結(jié),陽(yáng)性對(duì)照管出現(xiàn)凝結(jié),陰性對(duì)照管不凝結(jié),才可分辨試品為呈陽(yáng)性。
常見(jiàn)問(wèn)題
1.每過(guò)30min理應(yīng)立即觀查,由于一些菌種可造成葡萄球菌蛋白激酶,葡萄球菌蛋白激酶是一種溶化學(xué)纖維胰蛋白酶,可讓己匯集的血液再次融解,如不立即觀查便會(huì)造成假陰性結(jié)果。

3.不能在高鹽培養(yǎng)液上挑取菌體立即開(kāi)展血液凝結(jié)酶試驗(yàn),由于鹽能使血液自凝造成陽(yáng)性。
4.理應(yīng)應(yīng)用BHI新鮮塑造物,置放時(shí)間太長(zhǎng)的塑造物內(nèi)血液凝結(jié)酶促反應(yīng)會(huì)減少造成假陰性。